2004-12-10-世界卫生组织-WHO_Consultation_on_the_characterization_of_BCG_vaccines_16页_100kb

引言
BCG疫苗是目前唯一用于预防结核病的疫苗，因其多种亚株和生产控制变化，效力检测结果各异。WHO希望通过分子生物学技术改进疫苗的质量控制。

BCG疫苗分子表征
• NIBSC采用多重PCR检测亚株（如俄罗斯BCG-I、东京172-1株等），证实多个产品批次中未出现变异。
• 全基因组研究发现不同亚株存在基因组差异（如RD、DU、SNP变异）。但现行亚株已限缩至5种（俄、日、丹、法、莫），这些占BCG疫苗生产量的90%。
• PCR技术用于检测疫苗中的污染，灵敏度可达到1-1000个病原体基因组。

BCG疫苗效力检测
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• 活性计数检测
  现行方法中，基于ATP的快速检测法虽具优势，但仍与传统CFU法（耗时、变异性高）存在相关性问题。
  其他方法如流式细胞术（FDU）能够测定细胞活性与非活性菌比例，但需更广泛验证。

• 保护效力检测
  豚鼠模型用于比较疫苗保护效力，结果显示多个BCG亚株在菌载量、组织损伤、超敏反应等方面具有显著改善。
  然而，该方法仅适用新疫苗评价，不适于常规质量控制。

国际标准参考与稳定性
• WHO建议建立统一的BCG疫苗国际参考标准，以支持效力检测的标准化。
• 提出的是用于活菌计数的国际参考，还是用于保护效力的标准，存在一定分歧。
• 新型冻干技术中，加入谷氨酸钠可提高疫苗稳定性。疫苗稳定性满足于特定制冷条件下使用。

未来工作计划
• 发展高通量技术如DNA表达分析/基因组微阵列，比较不同亚株遗传标记。
• 利用PCR和快速检测方法优化污染检测和亚株识别。
• 推动保护效力检测方法标准化并纳入质量控制体系。

结论与建议
• 鉴于BCG疫苗目前的核心亚株在分子鉴定上具有代表性，其相似性可能导致病毒表型一致。
• 提高BCG效力检测精度与一致性，需改进现有检测方法，以支持疫苗更广泛的应用及与新疫苗的联合接种策略发展。
• 在WHO指导下，各国应协同推进检测标准化与国际参考标准的应用开发。